HyCyte®幹細胞專用一步凍存液（DMSO Free）

HyCyte®幹細胞專用一步凍存液（DMSO Free）特點：
DMF備案的幹細胞凍存液（DMSO Free）
GMP級
細胞存活率≥95%
產品不含DMSO
無血清、無蛋白、無任何動物源成分
組分明確，藥用級原料
支援直接凍存，無需程序降溫盒，使用簡單、穩定性高
DMSO是細胞保存中最常用的滲透型冷凍劑，但它對細胞也存在一定的毒性，常溫下能使胞內蛋白變性。DMSO導致的不良反應在動物實驗中已被證實。在一些臨床治療案例中，注射了含有DMSO的造血幹細胞的病人表現出噁心、頭痛、高血壓、腹瀉和腹部絞痛等症狀。因此對於臨床治療的細胞保存應該盡量減少DMSO的用量，或將其替換為一種更安全的冷凍保護劑。
HyCyte®幹細胞專用一步凍存液（DMSO Free），無DMSO、所有成分限定，純度高、化學特性穩定，無動物蛋白，無血清，無動物源成分，可避免動物蛋白的污染，適用於幹細胞的冷凍保存和應用。
HyCyte®幹細胞專用一步凍存液（DMSO Free），專門針對幹細胞特點研發，能降低凍存過程對幹細胞膜的損傷，維持高細胞復甦率，實現幹細胞高存活率的凍存和10年以上的長期保存。產品使用方便，無需特殊設備和儀器，無需程序降溫，重懸細胞後直接置於-80°C冰箱即可完成凍存。
品名：HyCyte®幹細胞專用一步凍存液（DMSO Free）
貨號：SCCP-A201
運輸保存：常溫運輸，未開啟有效期36個月，開啟後請在2個月內用完。
生產過程符合cGMP 標準規範，嚴格按照 ISO9001 國際品質管理體系對產品品質進行控制，產品通過微生物（細菌、真菌及黴漿菌等）、內毒素、pH 和滲透壓等臨床級要求檢測標準。
1. 本產品經過濾除菌，使用本產品時應注意無菌操作，避免污染。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。
3. 實驗結果可由多種因素影響，相關處理只限於產品本身，不涉及其他賠償。
支援直接凍存，解決幹細胞凍存操作流程繁瑣，凍存樣品數量大需要程序降溫盒的難點。
HyCyte®幹細胞專用一步凍存液（DMSO Free）細胞凍存步驟(Fig A):
a.按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的大小計算所需凍存細胞數（參考數量：5×10^5~1×10^7 cells/mL）。
b.離心收集細胞。（參考離心溫度：4℃）。
c.收集培養細胞沉澱，徹底棄去離心管中的上清。
d.加入4℃預冷適量的HyCyte®幹細胞專用一步凍存液於離心管中。輕柔地混勻細胞，製成細胞混合液。
e.將離心管中的細胞混合液分裝於已標記的凍存管中，建議每管1mL或1.5mL。
f.立即將凍存管直接置於-80℃冰箱中完成「快速」凍存操作，24小時後移入液氮或者-80℃長期保存。
注意：凍存細胞管不要緊密貼合放置，應該間隔放置，以免影響細胞的降溫。
Fig A HyCyte®幹細胞專用一步凍存液（DMSO-Free）凍存操作示意圖
能降低凍存過程對幹細胞的損傷，實現幹細胞細胞高存活率的凍存復甦
【HyCyte®幹細胞專用一步凍存液（DMSO Free），SCCP-A201】驗證凍存幹細胞，復甦擴增幹細胞的操作流程(Fig B)。
幹細胞來源：
HyCyte®成人骨髓間質幹細胞(BMHX-C106)
HyCyte®C57BL/6小鼠骨髓間質幹細胞(BMMC-C106)
培養基：
HyCyte®成人骨髓間質幹細胞完全培養基（BMHX-G101），復甦培養基
HyCyte®C57BL/6小鼠骨髓間質幹細胞完全培養基（BMMC-G101），復甦培養基
操作步驟：
a. 先在工作臺裡面準備復甦培養基（室溫），按照1：8（凍存液體積：復甦培養基體積）將復甦培養基加入15ml離心管中；並準備一個T75培養瓶，加入10~15ml復甦培養基，放入培養箱預熱；
b. 37℃水浴鍋復甦細胞，在1min內完全融解；
c. 將解凍後的細胞懸液加入到含復甦培養基的離心管中管中，溫柔混合靜置1min後，離心去除上清；
d. 使用間質幹細胞完全培養基進行重懸，按照正常過程進行培養。