代謝組學
捕捉表型變化的直接訊號，精確量化代謝產物，直觀反映生物體的生理狀態響應。
膽汁酸
膽汁酸（Bile Acids, BAs）為膽固醇於肝臟經多步酶促反應合成的一類類固醇化合物，主要包括膽酸（CA）、鵝去氧膽酸（CDCA）等初級膽汁酸，以及經腸道菌群代謝生成的去氧膽酸（DCA）、石膽酸（LCA）等次級膽汁酸，為膽汁核心功能成分。作為「代謝樞紐分子」，膽汁酸兼具消化吸收與訊號調控雙重功能：一方面經乳化脂肪促進脂類及脂溶性維生素（A、D、E、K）吸收；另一方面可作為訊號分子激活法尼醇 X 受體（FXR）、G 蛋白偶聯膽汁酸受體 1（TGR5）等路徑，調控糖脂代謝、發炎反應及腸道菌群平衡。其代謝紊亂與非酒精性脂肪肝、膽結石、肝硬化、糖尿病、大腸直腸癌等多種疾病密切相關，同時於動植物生理調控（如植物抗逆、水產動物脂代謝）亦發揮重要作用。相較傳統代謝標誌物，膽汁酸譜變化能更精準反映肝功能、腸道菌群恆定及全身代謝狀態。目前膽汁酸檢測已成為臨床診斷、藥物研發、基礎醫學研究核心技術之一，廣泛應用於肝膽疾病早期篩查、代謝性疾病機制解析、機能性食品功效驗證等領域，為跨學科研究提供重要技術支撐。
原理介紹
膽汁酸檢測核心原理基於「分離–鑑定–定量」技術體系，同時依託其特異性理化性質與訊號調控機制：1.分離原理——利用膽汁酸不同亞型（初級 / 次級、結合型 / 游離型）於層析柱中極性、疏水性差異，經超高效液相層析（UPLC）或液相層析–質譜聯用（LC-MS/MS）技術實現高效分離；2.鑑定與定量原理——結合質譜檢測器高靈敏度與特異性，經特徵母離子–子離子對匹配實現膽汁酸亞型精準鑑定，採內標法（如加入膽酸-d4、鵝去氧膽酸-d4 等穩定同位素內標）消除基質干擾，實現各亞型準確定量；3.功能關聯原理——經檢測樣品中膽汁酸譜組成比例、含量變化，結合其訊號路徑調控機制，分析肝臟代謝、腸道菌群及疾病狀態關聯，為機制研究提供資料支撐。
文獻案例
《Egyptian Liver Journal》所刊 “Exploring serum bile acids as potential noninvasive biomarkers for nonalcoholic fatty liver disease” 經系統分析血清膽汁酸譜，篩選出非酒精性脂肪肝（NAFLD）潛在無創生物標誌物，為疾病早期診斷提供科學依據。研究人員將受試者分為健康對照組、NAFLD 疑似患者組，所有受試者均經肝臟穿刺活檢明確病理診斷（含單純性肝脂肪變性、非酒精性脂肪性肝炎及早期肝纖維化）。團隊採 LC-MS/MS 技術檢測受試者血清樣品，全面分析 31 種膽汁酸亞型含量及組成特徵。機制探討表明，NAFLD 患者肝臟中膽汁酸合成關鍵酶（CYP7A1、CYP27A1）表達異常，導致初級膽汁酸合成增加，同時腸道菌群失衡（雙歧桿菌屬豐度降低、梭菌屬豐度升高）影響次級膽汁酸代謝，最終引發血清膽汁酸譜紊亂。研究證實血清膽汁酸譜可作為 NAFLD 無創診斷潛在標誌物組合，為臨床避免侵入性肝穿刺活檢提供新替代方案，也為 NAFLD 代謝機制研究提供關鍵資料支撐。
送樣標準
體積≥500μL/份，EDTA 或肝素抗凝（血漿），-80°C 密封保存，乾冰運輸；避免反覆凍融，須註明採樣時間（如空腹 / 餐後）
重量≥1g/份，液氮速凍後 -80°C 保存，乾冰運輸；避免樣品污染，須註明採樣部位（如結腸 / 直腸）及儲存條件
體積≥200μL/份，-80°C 密封避光保存，乾冰運輸；須標註膽汁來源（如肝膽汁 / 膽囊膽汁）
植物組織≥2g、動物組織≥1g、細胞沉澱≥1×10⁷個，液氮速凍後 -80°C 保存，乾冰運輸；須明確組織部位及處理條件（如藥物干預濃度、培養時間）
體積≥1mL/份，-80°C 密封保存，乾冰運輸；可添加 0.1% 疊氮化鈉防腐，註明採樣時間（如 24h 尿 / 晨尿）
交付內容
原始檢測資料
包括 LC-MS/MS 原始圖譜、各膽汁酸亞型保留時間、特徵離子峰匹配報告、峰面積定量原始資料
資料分析報告
涵蓋膽汁酸各亞型定性鑑定結果、含量定量表（單位：ng/mL 或 μg/g）、亞型組成比例統計圖、與對照組 / 標準庫差異分析
常見問題
①增加樣品淨化步驟（如固相萃取、液–液萃取）去除蛋白質、脂質等雜質；②優化層析條件（如調整流動相 pH 值、更換層析柱類型）改善分離效果；③採 MRM 模式（多反應監測）提高質譜檢測特異性，避開干擾離子峰；④更換純度更高內標與試劑，減少試劑污染。
①樣品採集條件不一致（如飲食差異、採樣時間不同）；②樣品處理流程不統一（如萃取時間、離心轉速差異）；③儀器狀態波動（如層析柱性能衰減、質譜檢測器靈敏度變化）。建議嚴格控制採樣與處理一致性，檢測前對儀器校準，設平行樣驗證（平行樣 RSD≤10%）。
